提到實(shí)驗(yàn)室你會(huì)想起什么?是裝滿(mǎn)各種“神秘液體”的試管和錐形瓶?還是一臺(tái)臺(tái)“高大上”又神秘莫測(cè)的實(shí)驗(yàn)儀器?提到科研人員你又會(huì)想起什么?是整齊化一的白大褂和橡膠手套?是一張張嚴(yán)肅認(rèn)真卻略顯刻板的臉?而這些科研人員每日待在不過(guò)幾十平方米的實(shí)驗(yàn)室里都在做些什么?本文作者就讀于中國(guó)科學(xué)院植物研究所,初進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室、作為科研小白的她跟大家講述她在實(shí)驗(yàn)室所經(jīng)歷的一天。
早晨7點(diǎn)30分的鬧鐘準(zhǔn)時(shí)響起,將我從沉沉的夢(mèng)中拽出,我掙扎著關(guān)上鬧鐘,心想再睡5分鐘。就在我即將再次沉入睡夢(mèng)中時(shí),腦海中突然浮現(xiàn)出“一抗”兩個(gè)字,我一個(gè)激靈坐了起來(lái):8點(diǎn)半前必須加上一抗。我看了下手機(jī)7:38,心想:我得抓緊了。
沖進(jìn)實(shí)驗(yàn)室大門(mén),分針指向8點(diǎn)25分??粗缫衙β灯饋?lái)的X師姐,一陣羞愧的熱浪瞬間沖散了我早上的起床氣。從冰箱吸出一抗加進(jìn)盛放PVED膜的盒子里,開(kāi)始計(jì)時(shí),8點(diǎn)28分。我松了一口氣,隨即撕下一張便利貼,寫(xiě)下“2:30pm洗膜&二抗”。
我快步去拿EP管,差點(diǎn)和手捧水稻苗的Y師姐撞在一起,師姐護(hù)著水稻苗卻濺了一身水,她卻不停地說(shuō),“對(duì)不起、對(duì)不起”,搞得我愧疚難當(dāng)。師姐看透了我的心思,笑了笑:“沒(méi)事兒,快干活兒吧,丫頭!”我紅著臉投入到了Real-time PCR實(shí)驗(yàn)中。
這時(shí)T師兄到我們屋的-30℃冰箱找連接酶,X師姐問(wèn)道:“師兄,你的文章投的怎么樣了?”T師兄淡淡地回道:“被拒了。”正在做實(shí)驗(yàn)的G師姐放下手中的移液槍,驚嘆道:“做了這么多實(shí)驗(yàn),這么多數(shù)據(jù),文章這么好怎么能就被拒了!”Y師姐邊取水稻葉片樣邊說(shuō):“怎么可能!我覺(jué)得投的那個(gè)雜志都太低了,質(zhì)量這么高的文章都能被拒!”T師兄將連接酶放到冰盒,回道:“那也不一定,如果正好碰上個(gè)專(zhuān)門(mén)做修飾組學(xué)的專(zhuān)家,那可能在他看來(lái)不夠深入。”說(shuō)完他就去做實(shí)驗(yàn)了。曉玉師姐說(shuō):“修飾組學(xué)動(dòng)物中做的比較多,水稻中研究的很少,T師兄在水稻中能做到這個(gè)程度已經(jīng)很不錯(cuò)了?!薄澳茄a(bǔ)實(shí)驗(yàn)又得一年半載的,T師兄這博后又得延期一段時(shí)間了?!薄叭薚師兄才不在乎這些,他一心撲在科研上,在他心里只有把實(shí)驗(yàn)做出來(lái)才是要緊的?!甭?tīng)了這些話(huà)我心里一陣唏噓,我加好的樣放到Real-time PCR儀里,緊接著就去提取水稻DNA。
光照培養(yǎng)間內(nèi)F師兄在拍冷處理過(guò)的水稻苗,W師姐舉著苗子在燈下觀察表型。我看著自己種下的水稻慢慢萌芽、出苗、長(zhǎng)成一排排頂著尖尖綠腦袋的小苗,會(huì)有一種“老母親”的幸福感。我剪下一株株水稻幼苗葉片放到EP管里,我看了看時(shí)間,已經(jīng)過(guò)去20分鐘了,取樣用了太多時(shí)間,后面實(shí)驗(yàn)要做不完了,不由得著急起來(lái)。我快速取好樣放到振蕩器上磨碎,磨碎需要3分鐘,這時(shí)間正好去做板瓊脂糖膠下午跑電泳用。
我從烘箱中取出充分反應(yīng)的葉片樣品到通風(fēng)櫥中加核酸提取液,即使是在通風(fēng)櫥中,提取液中氯仿刺鼻的氣味仍然嗆得我想趕緊加完,可忙中出錯(cuò),一管樣品灑了出來(lái),看著只剩下半管的樣品,我心疼不已,爾后才發(fā)現(xiàn)核酸提取液已經(jīng)將手套腐蝕出一條長(zhǎng)而猙獰的“燙傷”,不禁心驚后怕。
11點(diǎn)我端著樣品回實(shí)驗(yàn)臺(tái)離心,此時(shí),屋內(nèi)計(jì)時(shí)器鈴聲此起彼伏,大家急匆匆的在各個(gè)實(shí)驗(yàn)室各個(gè)儀器前穿梭,一個(gè)實(shí)驗(yàn)接一個(gè)實(shí)驗(yàn)恨不得身上綁上10個(gè)計(jì)時(shí)器。我看了看時(shí)間,11點(diǎn)10分,Real-time PCR應(yīng)該完成了,我趕緊跑去將96孔板取出,大致看了看Real-time PCR曲線,還不錯(cuò),懸著的心終于放下一半:做了3次,這次終于可能要做出來(lái)了,不過(guò)具體結(jié)果還要等晚上分析完數(shù)據(jù)才知道,我拷完數(shù)據(jù)接著回去提取DNA。這時(shí)公司測(cè)序返得菌液和質(zhì)粒送到了,我挑選出昨天晚上DNA序列比對(duì)正確的準(zhǔn)備搖菌提質(zhì)粒,在放滿(mǎn)錐形瓶、EP管的搖床找了個(gè)空位插了進(jìn)去,撕下一張便利貼寫(xiě)下“7:00pm小提質(zhì)粒”。
提取完DNA,終于有時(shí)間停下來(lái)喘口氣了,此時(shí)我才覺(jué)得嗓子干渴難耐,跑去休息室接水喝,休息室內(nèi)G師兄和T師兄猶如兩座大山巋然不動(dòng)地盯著電腦改文章,喝完水一看已經(jīng)11點(diǎn)30分了,心想:糟糕要趕不上吃飯了。我快步跑回實(shí)驗(yàn)室,開(kāi)始用TBST洗加完一抗的膜,每隔10分鐘洗一次要洗三次,吃飯前勉強(qiáng)能趕得上加二抗。
12點(diǎn)多,大家都忙完吆喝著一起去吃飯。去往餐廳的路上,亭亭玉立的美人榆、婀娜多姿的碧玉、豪放的連翹、大家閨秀般的西府海棠……林立路旁,各自風(fēng)姿綽約。走在春天的植物所,總讓人不禁生出“不到園中,怎知春色如許?”的感慨,看著滿(mǎn)園春色,實(shí)驗(yàn)的壓力和煩惱仿佛也彌散在這生機(jī)勃勃的春色中了。
越過(guò)這一路旖旎春光,我們便來(lái)到了餐廳,日常吐槽完飯菜的單調(diào)、沒(méi)味以及量少后,G師姐說(shuō):“昨天晚上我夢(mèng)見(jiàn)我的水稻著火了,火光滿(mǎn)天我在旁邊嚎啕大哭,水稻沒(méi)了,我這是別想畢業(yè)了?!盭師姐說(shuō):“前幾天我也夢(mèng)見(jiàn)我的小麥種子不萌發(fā),實(shí)驗(yàn)一點(diǎn)也做不下去,我束手無(wú)策地看著小麥種子急的眼淚直掉?!盰師姐笑著說(shuō):“你們這都是被實(shí)驗(yàn)逼瘋了吧!都瘋魔了,快別想了,趕緊吃飯吧!”記得不久前我還夢(mèng)見(jiàn)自己做實(shí)驗(yàn)加錯(cuò)試劑被師姐批評(píng),暗自心想:原來(lái)師姐們也會(huì)做這種噩夢(mèng)。
回到實(shí)驗(yàn)室后我趕緊加上二抗,記下“晚上洗膜&二抗”。隨即我繼續(xù)了昨天沒(méi)有成功的構(gòu)建實(shí)驗(yàn),昨天的實(shí)驗(yàn)可能是哪里出錯(cuò)了呢?各個(gè)樣品PCR擴(kuò)增條帶很亮,濃度不會(huì)很低,是不是酶切的質(zhì)粒載體濃度太低?也只能?chē)L試重新酶切質(zhì)粒載體。
這時(shí)公司送來(lái)了昨天我設(shè)計(jì)好的引物,上午提的DNA下午要跑PCR擴(kuò)增鑒定。等我做完P(guān)CR實(shí)驗(yàn),time上顯示載體還有十分鐘切好,我坐下來(lái),思索著接下來(lái)要做的實(shí)驗(yàn)。這時(shí)Z師姐來(lái)到我們屋,對(duì)X師姐說(shuō):“師姐,我連不上果然是因?yàn)榻宇^不行,昨天我換了你給我的接頭今天就連上了!” X師姐回道:“有時(shí)候接頭沒(méi)設(shè)計(jì)好或者選取的酶切位點(diǎn)不好就很難連上?!盭師兄在-30℃冰箱一陣翻找后對(duì)著Y師姐說(shuō):“KpnI沒(méi)有了!”Y師姐過(guò)去找也沒(méi)有找到對(duì)X師兄打趣道:“我這內(nèi)切酶斷貨,耽誤X老師畢業(yè)了?!盭師兄輕笑著嘲諷說(shuō):“那畢業(yè)這種大事也不是你能耽誤的!”
time響了起來(lái),我從烘箱取出切好的載體,到電泳槽前電泳。因?yàn)榄傊悄z所用染料具有一定潛在致癌性,所以我在橡膠手套外又戴上一次性手套,同時(shí)也要嚴(yán)格注意不能讓膠接觸到染料污染區(qū)外。電泳跑完后,我把膠拿到暗室紫外燈下,看到明亮的條帶后我小小開(kāi)心了下,然后小心翼翼地切下條帶放到EP管,準(zhǔn)備回收跑膠純化后的載體。我準(zhǔn)備好膠回收的管純化回收,為了提高濃度,最后用水洗脫兩次我才去測(cè)濃度,濃度很高,這次肯定能構(gòu)建上了。
我看了一下時(shí)間,下午4點(diǎn)30分,PCR擴(kuò)增應(yīng)該結(jié)束了,我取出擴(kuò)增后的樣品跑電泳,然后記錄下有條帶的樣品。我回到實(shí)驗(yàn)臺(tái),師姐提醒剛才time響了,連接已經(jīng)完成了,我趕緊取了冰盒去-80℃取感受態(tài)細(xì)胞。我用盡全身力氣打開(kāi)-80℃冰箱厚重的門(mén),一股刺骨的寒氣襲來(lái),我不禁打了個(gè)寒顫,容納-80℃感受態(tài)細(xì)胞的EP管放在手里總讓人聯(lián)想起液氮濺到身上的感覺(jué),接下來(lái)我將連接好的質(zhì)粒熱激進(jìn)入感受態(tài)細(xì)胞,然后加入培養(yǎng)液搖菌,搖菌大概需要半個(gè)小時(shí),趁這時(shí)間我到光照培養(yǎng)間給冷處理過(guò)的水稻苗澆水。
培養(yǎng)間內(nèi)我冷處理過(guò)的水稻苗呈現(xiàn)出半干枯狀態(tài)和野生型堅(jiān)挺形成鮮明對(duì)比,我內(nèi)心歡呼雀躍,想:再過(guò)兩天就可以拍照記錄了。我拿著搖好的菌液到超凈工作臺(tái)倒入培養(yǎng)基,正巧遇見(jiàn)D同學(xué)也在,她問(wèn)我:“你這實(shí)驗(yàn)昨天不是做過(guò)了嗎?”我嘆了口氣:“我就是條咸魚(yú),實(shí)驗(yàn)從來(lái)不會(huì)一次成功。”她也嘆了口氣:“誰(shuí)不都一樣,實(shí)驗(yàn)?zāi)哪芤淮尉统晒?#xff0c;我這互作做了一個(gè)月了不也是沒(méi)有做出來(lái)。”我們兩人頓時(shí)生出咸魚(yú)惺惺相惜之感。但是不管失敗多少次,都得繼續(xù)做。
不知不覺(jué)已經(jīng)晚上6點(diǎn)多了,我叫上師姐們一起去餐廳吃飯。走在路上,抬頭便能看見(jiàn)太陽(yáng)落在不遠(yuǎn)處的香山上,暮靄沉沉,一派安靜祥和。
回到實(shí)驗(yàn)室也已經(jīng)7點(diǎn)了,看到“晚上7點(diǎn)提質(zhì)粒”的便簽,我趕緊找來(lái)提質(zhì)粒的各種溶液,又從搖床取出早上搖的菌液,到離心機(jī)離心集菌,打開(kāi)搖菌管,菌液散發(fā)出一種特殊的味道,剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室時(shí)覺(jué)得這個(gè)味道特別臭,現(xiàn)在聞得多了反倒能感受到一種菌液特有的“菌香”。我提完質(zhì)粒,測(cè)好濃度已經(jīng)是快8點(diǎn)了,想想“二抗”已經(jīng)孵育5個(gè)小時(shí)了,我趕緊用TBST洗膜發(fā)光,我?guī)е赐甑哪?lái)到發(fā)光儀前發(fā)光,發(fā)光180秒并未看見(jiàn)明顯條帶,我干脆把模式調(diào)成了10分鐘。等待的過(guò)程不由得緊張起來(lái),就像等待考試結(jié)果那樣惴惴不安,畢竟是做了近半個(gè)月的實(shí)驗(yàn),失敗了好幾次,嘗試不同的實(shí)驗(yàn)方法和條件,可以說(shuō)這張膜凝聚了我半個(gè)月的心血,當(dāng)電腦屏幕上顯示出膜上一條較為清晰的條帶時(shí),我禁不住欣喜若狂起來(lái),站在旁邊的G師姐問(wèn)道:“發(fā)出來(lái)了?看把你高興的。”我沒(méi)有說(shuō)話(huà),抿著嘴笑起來(lái)算是默認(rèn)了。我在實(shí)驗(yàn)記錄本上寫(xiě)下:用flag標(biāo)簽?zāi)茈s出目的蛋白。
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